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3-Nitrotyrosine-Peroxidase Conjugate, 3-硝基酪氨酸-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物

2025-05-06 [139]

3-硝基酪氨酸-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物是一種通過(guò)化學(xué)交聯(lián)方法將3-硝基酪氨酸與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)連接而成的偶聯(lián)物。以下是其詳細(xì)介紹:

成分與結(jié)構(gòu)

  • 3-硝基酪氨酸(3-Nitrotyrosine,3-NT):是一種由過(guò)氧化亞硝酸鹽從L-酪氨酸合成的化合物,是一氧化氮和超氧化物的產(chǎn)物,可作為組織中過(guò)氧亞硝基陰離子(Peroxynitrite,ONOO-)水平的定量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),也是蛋白質(zhì)硝化(Protein Nitration)的產(chǎn)物。

  • 辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP):是一種由微生物或植物產(chǎn)生的氧化還原酶,以過(guò)氧化氫為電子受體催化底物氧化,主要存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過(guò)氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。

制備方法

通常采用化學(xué)交聯(lián)技術(shù),如碳二亞胺法等,將3-硝基酪氨酸與辣根過(guò)氧化物酶連接起來(lái),形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物。具體的制備過(guò)程可能包括反應(yīng)條件的優(yōu)化、純化步驟的設(shè)定等,以確保偶聯(lián)物的質(zhì)量和活性。

性質(zhì)特點(diǎn)

  • 溶解性:一般溶于磷酸鹽緩沖液(PBS)等生理溶液中,形成穩(wěn)定的溶液。

  • 穩(wěn)定性:在適當(dāng)?shù)谋4鏃l件下(如-20℃以下避光保存),該偶聯(lián)物能夠保持較長(zhǎng)的保質(zhì)期和穩(wěn)定性。

  • 生物活性:保留了3-硝基酪氨酸的生物活性,并通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶的催化功能實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大和檢測(cè)。

應(yīng)用領(lǐng)域

  • 生物醫(yī)學(xué)研究:可用于研究3-硝基酪氨酸的代謝途徑、生理功能以及與其他生物分子的相互作用等,為相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制研究提供重要依據(jù)。

  • 免疫檢測(cè):該偶聯(lián)物可用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等免疫檢測(cè)技術(shù)中,作為檢測(cè)抗體或抗原的標(biāo)記物,具有高靈敏度和特異性。

  • 疾病診斷與治療:由于3-硝基酪氨酸在多種疾病中的水平變化,其與辣根過(guò)氧化物酶的偶聯(lián)物有望在疾病的診斷和治療中發(fā)揮重要作用。

保存與運(yùn)輸

  • 保存條件:為確保偶聯(lián)物的穩(wěn)定性和活性,應(yīng)將其儲(chǔ)存在-20℃以下的避光環(huán)境中,并避免反復(fù)凍融或長(zhǎng)時(shí)間暴露在室溫下。

  • 運(yùn)輸條件:在運(yùn)輸過(guò)程中,應(yīng)保持低溫環(huán)境,并避免劇烈震動(dòng)和陽(yáng)光直射。

注意事項(xiàng)

  • 在使用過(guò)程中,應(yīng)注意監(jiān)測(cè)其活性和穩(wěn)定性,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

  • 應(yīng)嚴(yán)格遵守相關(guān)的操作規(guī)程和安全防護(hù)措施,避免與皮膚、眼睛等直接接觸。如不慎接觸,應(yīng)立即用大量清水沖洗并就醫(yī)。

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